прадукты

Ядзернае назапашванне мутантнай формы ядзернага бялку Lamin-A, званага Progerin (PG) або Lamin AΔ50, адбываецца пры сіндроме прагерыі Хатчынсана-Гілфарда (HGPS) або прагерыі, хваробы паскоранага старэння.Адным з асноўных сімптомаў гэтага генетычнага захворвання з'яўляецца страта падскурнага тлушчу з-за рэзкай ліпадыстрафіі. Мы стабільна індукавалі экспрэсію чалавечага PG і GFP -зялёнага флуарэсцэнтнага бялку - у якасці кантролю ў клетках 3T3L1 з дапамогай лентывіруснай сістэмы для вывучэння уплыў экспрэсіі PG на здольнасць дыферэнцыявання гэтай клетачнай лініі, адна з найбольш часта выкарыстоўваных мадэляў адыпагеннага росту.Для вывучэння эфекту назапашвання PG была зроблена колькасная пратэёміка (iTRAQ).Некалькі з мадуляваных бялкоў былі пацверджаны імунаблотінгам і ПЦР у рэальным часе.Функцыя мітахондрый была прааналізавана шляхам вымярэння а) базальнай актыўнасці мітахондрый, б) вытворчасці супероксидного аніёна і в) індывідуальнай эфектыўнасці розных комплексаў дыхальнага ланцуга. Мы выявілі, што залішняя экспрэсія PG шляхам дастаўкі гена lentivi ral прыводзіць да зніжэнне хуткасці праліферацыі і дэфектаў у адыпагеннай здольнасці ў параўнанні з кантролем.Колькасны аналіз пратэёмікі паказаў, што 181 бялок значна (p<0,05) мадулюецца ў прэадыпацытах, якія экспрэсуюць PG.Функцыя мітахондрый парушаная ў PG-экспрессирующих клетках.У прыватнасці, мы выявілі павышэнне актыўнасці комплексу I і перавытворчасць аніёна супероксида.Інкубацыя з агентамі-паглынальнікамі актыўных формаў кіслароду (АФК) прыводзіць да зніжэння аўтафагічнага пратэалізу, што выяўляецца па суадносінах LC3-II/LC3-I. Экспрэсія PG у клетках 3T3L1 спрыяе зменам у некалькіх біялагічных працэсах, уключаючы структуру цыташкілета, ліпідны абмен, кальцый рэгуляцыя, трансляцыя, згортванне бялкоў і выпрацоўка энергіі мітахондрыямі.Нашы дадзеныя ўзмацняюць уклад назапашвання АФК у фенатып заўчаснага старэння і ўсталёўваюць сувязь паміж мітахандрыяльнай дысфункцыяй і стратай протеостаза ў HGPS.