прадукты

Mycobacterium tuberculosis можа захоўвацца ў арганізме чалавека дзесяцігоддзямі.Мяркуецца, што строгія шляхі адказу з удзелам неарганічнага поліфасфату [полі(P)], які сінтэзуецца і гідралізуецца поліфасфаткіназай (PPK) і экзапаліфасфатазай (PPX), адыгрываюць ключавую рэгуляторную ролю ў персістэнцыі бактэрый.Тут мы паказваем, што назапашванне M. tuberculosis poly(P) часова звязана з абмежаваннем росту бацыляраў.Мы таксама ідэнтыфікуем M. tuberculosis Rv1026 як новую экзапаліфасфатазу з гідралітычнай актыўнасцю супраць доўгаланцуговага полі(Р).Выкарыстоўваючы індуцыраваную тэтрацыклінам сістэму экспрэсіі для паніжэння экспрэсіі Rv1026 (ppx2), мы выявілі, што назапашванне M. tuberculosis poly(P) прыводзіць да запаволення росту і зніжэння адчувальнасці да изониазиду, павышэння ўстойлівасці да цяпла і кіслотнага рн і павышэння ўнутрыклеткавага выжывання падчас інфікавання макрофагов.З дапамогай трансмісійнай электроннай мікраскапіі накдаўн-штам ppx2 выявіў павелічэнне таўшчыні клеткавай сценкі, што было звязана з паніжанай пранікальнасцю клеткавай сценкі для гідрафільных лекаў, а не з індукцыяй помпаў для выцякання лекаў або змяненнем фарміравання біяплёнкі ў параўнанні з кантролем пустога вектара.Транскрыптамічны і метабаламічны аналіз паказаў метабалічны зрух накдаўну ppx2, які характарызуецца зніжэннем транскрыпцыі і трансляцыі і паніжэннем узроўняў гліцэрын-3-фасфату.Такім чынам, полі(Р) гуляе важную ролю ў абмежаванні росту M. tuberculosis і метабалічным паніжэнні, а таксама спрыяе павышэнню талерантнасці да антыбіётыкаў праз змену пранікальнасці клеткавай сценкі. Строгі адказ з удзелам рэгулятарных малекул неарганічнага поліфасфату [полі(Р)] і (р Мяркуецца, што )ppGpp з'яўляецца апасродкаваннем персистенции Mycobacterium tuberculosis.У гэтым даследаванні мы вызначылі новы фермент (Rv1026, PPX2), адказны за гідраліз полі(Р) з доўгім ланцугом.Генна-інжынерны штам M. tuberculosis з дэфіцытам гена ppx2 паказаў павышэнне ўзроўню полі(Р), што было звязана з раннім прыпыненнем росту бактэрый і паніжанай здольнасцю да прэпарата першага шэрагу изониазидом, а таксама павелічэннем выжывальнасці бактэрый падчас уздзеяння стрэсу умовах і ўнутры макрофагов.У параўнанні з кантрольным штамам мутант паказаў павялічаную таўшчыню клеткавай сценкі і паменшаную пранікальнасць да лекаў.Глабальная экспрэсія генаў і аналіз метабалітаў выявілі зніжэнне экспрэсіі механізмаў транскрыпцыі і трансляцыі і зрух у выкарыстанні крыніцы вугляроду.Падводзячы вынік, рэгуляцыя полі(Р) балансу мае вырашальнае значэнне для адукацыі персистеров у M. tuberculosis.