прадукты

Акісляльнае пашкоджанне асноў ДНК звычайна прыводзіць да адукацыі акісленых пурынаў, у прыватнасці 7,8-дыгідра-8-оксагуаніну (8-оксоГ) і 7,8-дыгідра-8-оксаадэніна (8-оксаА), прычым першы з'яўляецца добра вядомае мутагеннае паражэнне.Паколькі 8-oxoG лёгка падвяргаецца далейшаму акісленню ў параўнанні са звычайнымі асновамі, устаўка асновы падчас сінтэзу ДНК насупраць акісленай формы 8-oxoG была даследавана in vitro.Сінтэтычную матрицу, якая змяшчае адно паражэнне 8-oxoG, спачатку апрацоўвалі рознымі аднаэлектроннымі акісляльнікамі або ва ўмовах сінглетнага кіслароду, а затым падвяргалі падаўжэнню праймера, каталізаванаму фрагментам Кленава экза- (Kf экзо-), ДНК-палімеразай альфа тымусу цяля (pol альфа ) або ДНК-палімераза чалавека бэта (pol beta).У адпаведнасці з папярэднімі паведамленнямі, dAMP і dCMP выбарча ўстаўляюцца насупраць 8-oxoG з усімі трыма ДНК-палімеразамі.Цікава, што было выяўлена, што акісленне 8-oxoG індукуе ўстаўку dAMP і dGMP насупраць паразы з дапамогай Kf exo- з часовым інгібіраваннем пашырэння праймера, якое адбываецца ў месцы мадыфікаванай асновы.Акрамя таго, паражэнне ўяўляе сабой блок падчас сінтэзу ДНК pol alpha і pol beta.Эксперыменты з 8-oxoA-мадыфікаваным матрычным алігануклеатыдам паказваюць, што і 8-oxoA, і акісленая форма 8-oxoA непасрэдна ўстаўляюць dTMP з дапамогай Kf exo-.Мас-спектраметрычны аналіз алігануклеатыдаў, якія змяшчаюць 8-oxoG, да і пасля акіслення IrCl62-адпаведны з акісленнем галоўным чынам сайта 8-oxoG, што прыводзіць да адукацыі гуанідзінагідантаінавай часткі ў якасці асноўнага прадукту.Ніякіх доказаў адукацыі абазічных сайтаў не атрымана.Гэтыя вынікі дэманструюць, што акісленая форма 8-oxoG, магчыма, гуанідзінагідантаін, можа накіраваць няправільнае чытанне і памылковую ўстаўку dNTP падчас сінтэзу ДНК.Калі б такі працэс адбываўся in vivo, ён уяўляў бы сабой кропкавае мутагеннае паражэнне, якое вядзе да трансверсій G-->T і G-->C.Аднак адпаведная акісленая форма 8-оксаА ў першую чаргу паказвае правільную ўстаўку Т падчас сінтэзу ДНК з Kf экза-.