прадукты

Больш за 70% глиом низкой ступені нясуць гетерозиготную мутацыю R132H у гене, які кадуе изоцитратдегидрогеназу 1 (IDH1).Гэта надае ферменту новую здольнасць пераўтвараць α-кетаглутарат у 2-гідраксіглутарат, што ў канчатковым выніку прыводзіць да адукацыі пухлін.Асноўнай крыніцай выпрацоўкі 2-гідраксіглутарату з'яўляецца глютамін, які пры раку таксама з'яўляецца крыніцай анаплерозу цыкла трыкарбонавых кіслот (ТЦА).Альтэрнатыўнай крыніцай анаплерозу з'яўляецца паток пирувата праз пируваткарбоксилазу (ПК), які з'яўляецца агульным шляхам у нармальных астроцитах.Мэта гэтага даследавання складалася ў тым, каб вызначыць, ці служыць ПК крыніцай анаплерозу ТСА ў мутантных клетках IDH1, у якіх глютамін выкарыстоўваецца для вытворчасці 2-гідраксіглутарату. Былі даследаваны іммарталізаваныя нармальныя астрацыты чалавека, створаныя для экспрэсіі гетэразіготнага мутантнага IDH1 або IDH1 дзікага тыпу.Паток пірувата праз PC і праз піруватдэгідрагеназу (PDH) вызначалі з дапамогай магнітна-рэзананснай спектраскапіі для праверкі маркіроўкі [2-¹³C]глюкозы ¹³C-labe прывялі глутамата і глютаміну.Аналізы актыўнасці, RT-PCR і Вестэрн-блот былі выкарыстаны для праверкі экспрэсіі і актыўнасці адпаведных ферментаў.Дадзеныя Cancer Genome Atlas (TCGA) былі прааналізаваны для ацэнкі экспрэсіі ферментаў ва ўзорах гліёмы чалавека. У параўнанні з клеткамі дзікага тыпу мутантныя клеткі IDH1 значна павялічылі фракцыйны паток праз ПК.Гэта было звязана са значным павелічэннем актыўнасці і экспрэсіі ПК.Адначасова актыўнасць PDH значна знізілася, верагодна, за кошт значнага павелічэння інгібіруючага фасфаралявання PDH PDH-киназой 3. У адпаведнасці з назіраннямі ў клетках, аналіз дадзеных TCGA паказаў значнае павелічэнне экспрэсіі PC у мутантных узорах гліёмы чалавека, якія экспрэсуюць IDH, у параўнанні з дзікімі. тыпу IDH. Нашы вынікі паказваюць, што змены ў PC і PDH могуць быць важнай часткай клеткавай адаптацыі да мутацыі IDH1 і могуць служыць патэнцыйнымі тэрапеўтычнымі мішэнямі.