X-GAL CAS:7240-90-6 98% ад белага да амаль белага крышталічнага парашка
Нумар па каталогу | XD90008 |
Назва прадукту | X-Gal (5-бром-4-хлор-3-індаліл-бэта-D-галактопиранозид) |
CAS | 7240-90-6 |
Малекулярная формула | C14H15BrClNO6 |
Малекулярная маса | 408,63 |
Дэталі захоўвання | ад -2 да -6 °C |
Гарманізаваны тарыфны кодэкс | 29400000 |
Спецыфікацыя прадукту
Знешні выгляд раствора | Празрысты раствор ад бескаляровага да светла-жоўтага (50 мг/мл у DMF:MeOH, 1:1) |
Удзельнае аптычнае вярчэнне | -61,5 +/- 1 |
Знешні выгляд | Крышталічны парашок ад белага да белага |
Чысціня ВЭЖХ | мінімум 99% |
Растваральнасць (5 % у ДМФ) | Растваральны (5% мас./аб., ДМФ) |
Водны КФ | максімум 1% |
Аналіз (ВЭЖХ на бязводнай аснове) | мінімум 98% мас |
Выкарыстанне X-gal
X-gal (таксама скарочана BCIG для 5-бром-4-хлор-3-індаліл-β-D-галактапіранозіду) - гэта арганічнае злучэнне, якое складаецца з галактозы, звязанай з замешчаным індолам.Злучэнне было сінтэзавана Джэромам Хорвіцам і яго супрацоўнікамі ў 1964 годзе. Афіцыйная хімічная назва часта скарачаецца да менш дакладных, але таксама менш грувасткіх фраз, такіх як бромхлоріндаксілгалактазід.X з індаксілу можа быць крыніцай X у скарачэнні X-gal.X-gal часта выкарыстоўваецца ў малекулярнай біялогіі для праверкі наяўнасці фермента, β-галактозидазы, замест яго звычайнай мішэні, β-галактозида.Ён таксама выкарыстоўваецца для выяўлення актыўнасці гэтага фермента ў гістахіміі і бактэрыялогіі.X-gal з'яўляецца адным з многіх індаксілавых глікозідаў і складаных эфіраў, якія даюць нерастваральныя сінія злучэнні, падобныя на фарбавальнік індыга, у выніку каталізаванага ферментамі гідролізу.
X-gal з'яўляецца аналагам лактозы і, такім чынам, можа быць гидролизован ферментам β-галактозидазой, які расшчапляе β-гліказідную сувязь у D-лактозе.X-gal пры расшчапленні β-галактазідазай дае галактозу і 5-бром-4-хлор-3-гідраксііндол - 1. Апошні затым самаадвольна дымерызуецца і акісляецца ў 5,5'-дыбром-4,4'-дыхлара -індыга - 2, інтэнсіўна сіні прадукт, які не раствараецца.X-gal сам па сабе бескаляровы, таму прысутнасць сіняга колеру прадукту можа быць выкарыстана ў якасці тэсту на наяўнасць актыўнай β-галактозидазы.Гэта таксама дазваляе выкарыстоўваць бактэрыяльную β-галактазідазу (так званую lacZ) у якасці рэпарцёра ў розных прыкладаннях.
У двухгібрыдным аналізе β-галактазідаза можа быць выкарыстана ў якасці рэпарцёра для ідэнтыфікацыі бялкоў, якія ўзаемадзейнічаюць адзін з адным.У гэтым метадзе бібліятэкі геному могуць быць правераны на ўзаемадзеянне бялкоў з дапамогай дражджавой або бактэрыяльнай сістэмы.Калі ёсць паспяховае ўзаемадзеянне паміж вавёркамі, якія падвяргаюцца скрынінгу, гэта прывядзе да звязвання дамена актывацыі з промотором.Калі прамотар звязаны з генам lacZ, выпрацоўка β-галактозидазы, якая прыводзіць да адукацыі сіне-пігментаваных калоній у прысутнасці X-gal, будзе сведчыць аб паспяховым узаемадзеянні паміж вавёркамі.Гэты метад можа быць абмежаваны скрынінгам бібліятэк памерам менш за 106. Паспяховае расшчапленне X-gal таксама стварае прыкметны непрыемны пах з-за выпарэння індолу.
Паколькі X-gal сам па сабе бясколерны, наяўнасць сіняга колеру можа быць выкарыстана ў якасці тэсту на наяўнасць актыўнай β-галактозидазы.
Такая простая ідэнтыфікацыя актыўнага фермента дазваляе выкарыстоўваць ген β-галактазідазы (ген lacZ) у якасці рэпарцёрнага гена ў розных сферах прымянення.