прадукты

LecA (PA-IL) - гэта цітотоксіческой лекцін і адгезін, якія ўтвараюцца сінегнойную палачкай і звязваюць гідрафобныя галактозіды з высокай спецыфічнасцю і сродством.Выкарыстоўваючы зліццё трансляцыі lecA-egfp і імунаблот-аналіз пазаклеткавага матрыкса біяплёнкі, мы паказваем, што lecA выяўляецца ў клетках, вырашчаных на біяплёнцы.У статычных аналізах біяплёнкі як на полістыроле, так і на нержавеючай сталі, глыбіня і пакрыццё паверхні біяплёнкі былі паменшаны за кошт мутацыі lecA і ўзмоцнены ў штаме PAO-P47, які падвышана прадуцыруе LecA.Пакрыццё паверхні біяплёнкі бацькоўскім штамам PAO-P47, але не мутантам lecA на сталёвых купонах, таксама інгібіравалася ростам у прысутнасці альбо ізапрапіл-бэта-D-тыагалактазіду (IPTG), альбо п-нітрафеніл-альфа-D-галактозіда ( НПГ).Акрамя таго, спелыя біяплёнкі дзікага тыпу, якія ўтвараюцца ў адсутнасць гэтых гідрафобных галактозідаў, могуць быць рассеяны шляхам дадання IPTG.У адрозненне ад гэтага, даданне п-нітрафеніл-альфа-L-фукозы (НПФ), якая мае высокае сродство да лектаў P. aeruginosa LecB (PA-IIL), не ўплывала на адукацыю або распаўсюджванне біяплёнкі.На планктонны рост P. aeruginosa PAO1 не паўплывала прысутнасць IPTG, NPG або NPF, а таксама штам не змог выкарыстоўваць гэтыя цукру ў якасці крыніц вугляроду, што сведчыць аб тым, што назіраныя эфекты на фарміраванне біяплёнкі былі абумоўлены канкурэнтным інгібіраваннем LecA-ліганда пераплёт.Падобныя вынікі былі таксама атрыманы для біяплёнак, вырашчаных ва ўмовах дынамічнага патоку на сталёвых купонах, што сведчыць аб тым, што LecA спрыяе архітэктуры біяплёнкі P. aeruginosa ў розных умовах навакольнага асяроддзя.

Альфа-L-фуказідаза (EC 3.2.1.51), здольная вызваляць астатак т-фукозіла з бакавога ланцуга алігацукрыдаў ксілаглюкана, была выяўлена ў лісці раслін Arabidopsis.Больш за тое, альфа-L-фукозідаза з падобнай субстратнай спецыфічнасцю была ачышчана з лісця капусты (Brassica oleracea) для адлюстравання адной паласы на SDS-PAGE.Дзве пептыдныя паслядоўнасці былі атрыманы з гэтай паласы бялку, і яны былі выкарыстаны для ідэнтыфікацыі гена Arabidopsis, кадавальнага для альфа-фукозидазы, якую мы прапануем назваць AtFXG1.Акрамя таго, быў знойдзены ген Arabidopsis з гамолагі з вядомымі альфа-L-фукозидазами, і мы прапанавалі назваць яго AtFUC1.Як AtFXG1, так і ATFUC1 гетэралагічна экспрэсіраваліся ў клетках Pichia pastoris, а актыўнасць альфа-L-фуказідазы вылучалася ў культуральную сераду.Альфа-L-фукозідаза, кадзіраваная AtFXG1, была актыўная супраць алігацукрыдаў з ксілаглюкана XXFG, а таксама супраць 2'-фукозіл-лактытолу, але не супраць п-нітрафеніл-альфа-L-фукапіранозіду.Тым не менш, AtFUC1, гетэралагічна выяўлены, быў актыўны толькі супраць 2'-фукозіл-лактыта.Такім чынам, першае павінна быць звязана з метабалізмам ксілаглюкана.