прадукты

1. Метады прафілявання метабалітаў з'яўляюцца важнымі інструментамі для вымярэння пулаў метабалітаў у біялагічных сістэмах.У той час як большасць метадаў прафілявання метабалітаў паведамляюць аб адноснай інтэнсіўнасці або залежаць ад некалькіх унутраных стандартаў, якія прадстаўляюць усе метабаліты, канчатковае патрабаванне для колькаснага апісання пула метабалітаў у біялагічных клетках і вадкасцях - гэта вызначэнне абсалютнай канцэнтрацыі.Мы паведамляем тут пра метад мэтанакіраванага прафілявання метабалітаў з высокай прапускной здольнасцю і адчувальнай газавай храматаграфіі/тандэмнай мас-спектраметрыі (ГХ/МС/МС), які дазваляе атрымаць абсалютную колькасную ацэнку ўсіх выяўленых метабалітаў.Метад заснаваны на дэрыватызацыі метилхлорформиата і колькасным вызначэнні шляхам дабаўлення ўзораў стандартаў метабалітаў, асобна дэрыватызаваных дейтерированными рэагентамі дэрыватызацыі.Традыцыйная іянізацыя электронным ударам замяняецца на станоўчую хімічную іанізацыю, паколькі апошняя ў значна большай ступені захоўвае малекулярны іон і іншыя высокамалекулярныя фрагменты.Гэта палягчае выбар унікальных пераходаў MS/MS сярод мноства метабалітаў, якія адначасова элюіруюць.У цяперашні час новы метад ГХ/МС/МС уключае 67 агульных першасных метабалітаў, большасць з якіх належаць да груп аміна- і неаміна-арганічных кіслот.Мы паказваем дастасавальнасць метаду на пробах мачы і сыроваткі.Метад з'яўляецца значным удасканаленнем цяперашняй метадалогіі колькаснага прафілявання метабалітаў амінакіслот і неамінамінавых арганічных кіслот ГХ/МС.

2,24S-гідраксіхалестэрын (24OHC) і 27-гідраксіхалестэрын (27OHC) - гэта два структурна падобныя аксістэролы рознага паходжання - першы амаль выключна ўтвараецца ў мозгу, а другі - у меншай ступені ў мозгу, чым у большасці іншых органаў.ГІПОТЭЗА, ЯКАЯ ТРЭБА ПРАВЕРІЦЬ: пашкоджанне нейронаў і/або дэміелінізацыя выклікае павелічэнне патоку 24OHC з мозгу ў спіннамазгавую вадкасць (СМЖ), у той час як дэфект гематоэнцефаліческій бар'ера выклікае павелічэнне патоку 27OHC з цыркуляцыі ў СМЖ. Развядзенне ізатопнай масы Спектраметрыя была выкарыстаная для аналізу двух оксистеролов ў СМЖ і плазме больш чым 250 пацыентаў з рознымі неўралагічнымі і герыятрычнымі захворваннямі. На ўзроўні СМЖ двух оксистеролов значна больш паўплывалі розныя захворванні, чым узровень у плазме.Пацыенты з актыўнымі дэміалінізуючымі захворваннямі мелі павышаны ўзровень 24OHC у СМЖ з адносна высокім стаўленнем 24OHC/27OHC.Пацыенты з менінгітам у цэлым мелі высокі ўзровень абодвух стэроідаў з нізкім суадносінамі 24OHC/27OHC.Пацыенты з хваробай Альцгеймера мелі нязначнае павышэнне ўзроўню 24OHC ў СМЖ з меншым павелічэннем 27OHC.Пацыенты з безуважлівым склерозам мелі тэндэнцыю да больш высокіх узроўняў 24OHC падчас актыўных перыядаў з высокім суадносінамі 24OHC/27OHC. Вымярэнні двух аксістэролаў у СМЖ і плазме могуць значна дапоўніць існуючыя біяхімічныя метады ацэнкі неўралагічных захворванняў.